Mach1-T1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述：Mach1-T1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
Mach1-T1菌株由野生型non-K-12 E. Coli W菌株改造而來(lái)，是目前生長(zhǎng)速度較快的感受態(tài)細(xì)胞之一，在平板上 8h可見克隆，缺失核酸內(nèi)切酶（endA），提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量；重組酶缺陷型（recA1398）減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩(wěn)定性。

更新時(shí)間：2022-01-18

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

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詳情介紹

品牌	其他品牌	貨號(hào)	BFNC86005
規(guī)格	20x100ul/100x100ul	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	僅用于科研	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

Mach1-T1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品規(guī)格CAT#: BFNC86005-01(20×100ul)/BFNC86005-02(100×100ul)

Mach1-T1: 100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl): 10μl

保存條件(保質(zhì)期)： -80℃（6個(gè)月）

基因型

F^- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(r_K^-m_K⁺) ΔrecA1398 endA1 tonA

產(chǎn)品說(shuō)明

Mach1-T1菌株由野生型non-K-12 E. Coli W菌株改造而來(lái)，是目前生長(zhǎng)速度較快的感受態(tài)細(xì)胞之一，在平板上 8h可見克隆，缺失核酸內(nèi)切酶(endA)，提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量；重組酶缺陷型(recA1398)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入DNA的穩(wěn)定性；lacZΔM15的存在使Mach1-T1可用于藍(lán)、白斑篩選；tonA突變賦予Mach1-T1菌株對(duì)噬菌體T1和T5的抗性。

青旗生物生產(chǎn)的Mach1-T1感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>10⁹cfu/μg DNA。

操作方法

1. Mach1-T1感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物) 并用手bo打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3.向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少13小時(shí)。

Mach1-T1化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

注意事項(xiàng)

1. 感受態(tài)細(xì)胞適宜在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。