1、細(xì)胞上清：前處理有必要把細(xì)胞離心去掉，每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時(shí)，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋?zhuān)?/div>
2、腦脊液：前處理有必要把細(xì)胞離心去掉，每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時(shí)，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋?zhuān)?/div>
3、血清血漿：請(qǐng)參與50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本，如稀釋量大，請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量參與，缺少部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液賠償至100ul；
4、組織勻漿液的樣本，要制備過(guò)程中需要在緩沖液中參與蛋白酶抑制劑，防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解，構(gòu)成查看效果的值偏低。
上海elisa試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、把試劑混勻，切記實(shí)驗(yàn)時(shí)不要加理大量含有泡沫的液體，避免實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生誤差。
2、跟數(shù)據(jù)測(cè)樣決定板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔 加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7、每孔加入底物各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。一定要避免光照。
8、取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9、在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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