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上海elisa試劑盒是如何進(jìn)行操作的?

發(fā)布時(shí)間: 2022-11-26  點(diǎn)擊次數(shù): 985次
  上海elisa試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在植物學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
 
  上海elisa試劑盒的技術(shù)關(guān)鍵:
  1、細(xì)胞上清:前處理有必要把細(xì)胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋;
  2、腦脊液:前處理有必要把細(xì)胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋;
  3、血清血漿:請(qǐng)參與50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大,請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量參與,缺少部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液賠償至100ul;
  4、組織勻漿液的樣本,要制備過(guò)程中需要在緩沖液中參與蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解,構(gòu)成查看效果的值偏低。
 
  上海elisa試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作步驟:
  1、把試劑混勻,切記實(shí)驗(yàn)時(shí)不要加理大量含有泡沫的液體,避免實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生誤差。
  2、跟數(shù)據(jù)測(cè)樣決定板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
  3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔 加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
  4、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
  5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
  6、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
  7、每孔加入底物各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。一定要避免光照。
  8、取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
  9、在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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