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大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞L6

大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞L6

簡要描述:青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司,總部位于上海浦東新區(qū),依托本地高校資源,逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺,在標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞庫建立及細(xì)胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營原代細(xì)胞、細(xì)胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細(xì)胞和HPLC檢測等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對用戶負(fù)責(zé)的態(tài)度,以對科研的高度嚴(yán)謹(jǐn),以嚴(yán)格的質(zhì)量控制,為廣大生物醫(yī)學(xué)科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)!

更新時間:2021-05-19

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

瀏覽次數(shù):489

詳情介紹
品牌其他品牌貨號BFN60700292
規(guī)格T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2供貨周期現(xiàn)貨
主要用途僅供科研應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

細(xì)胞名稱

大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞L6                

img1

貨物編碼

BFN60700292

產(chǎn)品規(guī)格

T25培養(yǎng)瓶x1

1.5ml凍存管x2

細(xì)胞數(shù)量

1x10^6

1x10^6

保存溫度

37℃

-198℃

運(yùn)輸方式

常溫保溫運(yùn)輸

干冰運(yùn)輸

安全等級

1

用途限制

僅供科研用途                1類

 

培養(yǎng)體系

DMEM高糖培養(yǎng)基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone)

培養(yǎng)溫度

37℃

二氧化碳濃度

5%

簡介

大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞L6細(xì)胞是Yaffe在甲基膽蒽存在的情況下從大鼠大腿肌原代培養(yǎng)的最初兩代細(xì)胞中分離得到的;在培養(yǎng)基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維,細(xì)胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降,因此細(xì)胞應(yīng)低代次冷凍并周期性地重新克隆以選擇融合能力強(qiáng)的細(xì)胞。鼠痘病毒陰性。該細(xì)胞應(yīng)在達(dá)匯合狀態(tài)前傳代,以延緩細(xì)胞分化能力的喪失。

注釋

Transformant: ChEBI; CHEBI:34342; 3-methylcholanthrene (MCA).

STR信息

/

參考文獻(xiàn)

PubMed=5245982; DOI=10.1073/pnas.61.2.477

Yaffe D.

Retention of differentiation potentialities during prolonged c*tion of myogenic cells.

Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 61:477-483(1968)

 

PubMed=5481965; DOI=10.1016/S0012-1606(70)80004-5

Richler C., Yaffe D.

The in vitro c*tion and differentiation capacities of myogenic cell lines.

Dev. Biol. 23:1-22(1970)

 

PubMed=7297605; DOI=10.1016/0014-4827(81)90032-X

Parfett C.L.J., Jamieson J.C., Wright J.A.

A correlation between loss of fusion potential and defective formation of mannose-linked lipid intermediates in independent concanavalin A-resistant myoblast cell lines.

Exp. Cell Res. 136:1-14(1981)

 

 

驗收細(xì)胞注意事項

1、收到大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6細(xì)胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系。

2、收到大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6細(xì)胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺盼藍(lán)染色證實細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理。

3、收到大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6細(xì)胞后,請鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請離心收集細(xì)胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。

4、收到大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6細(xì)胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過 80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時之需。

6、24 小時后,大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn))PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時,換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。

 

特別提醒: 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。



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