歡迎您,來到青旗(上海)生物技術發(fā)展有限公司!
簡要描述:青旗(上海)生物技術發(fā)展有限公司,總部位于上海浦東新區(qū),依托本地高校資源,逐步發(fā)展成為以生物技術為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺,在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營原代細胞、細胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細胞和HPLC檢測等科研產(chǎn)品與服務。我們秉承對用戶負責的態(tài)度,以對科研的高度嚴謹,以嚴格的質(zhì)量控制,為廣大生物醫(yī)學科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務!
更新時間:2021-05-24
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN608006383 |
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規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 僅供科研 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
細胞名稱 | 人肝癌細胞HepG2.2.15 | ||
貨物編碼 | BFN608006383 | ||
產(chǎn)品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數(shù)量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研 1類 |
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone) | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人肝癌細胞HepG2.2.15細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結合蛋白;表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體;該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。 | ||
注釋 | Characteristics: Contains 2 head to tails stably integrated HBV of the D-genotype. | ||
STR信息 | Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:9,13;D16S539:12,13;D18S51:13,14;D19S433:15.2;D21S11:29,31;D2S1338:19,20;D3S1358:15,16;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:15,16;FGA:22,25;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:17; | ||
參考文獻 | PubMed=3029758; DOI=10.1073/pnas.84.4.1005 Sells M.A., Chen M.L., Acs G. Production of hepatitis B virus particles in Hep G2 cells transfected with cloned hepatitis B virus DNA. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84:1005-1009(1987) PubMed=21448419; DOI=10.3748/wjg.v17.i9.1152 Zhao R., Wang T.-Z., Kong D., Zhang L., Meng H.-X., Jiang Y., Wu Y.-Q., Yu Z.-X., Jin X.-M. Hepatoma cell line HepG2.2.15 demonstrates distinct biological features compared with parental HepG2. World J. Gastroenterol. 17:1152-1159(2011) PubMed=29481805; DOI=10.1016/j.bbrc.2018.02.175 Ogura N., Ogawa K., Watashi K., Ito T., Wakita T. Novel stable HBV producing cell line systems for expression and screening antiviral inhibitor of hepatitis B virus in human hepatoma cell line. Biochem. Biophys. Res. Commun. 498:64-71(2018)
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驗收細胞注意事項
1、收到人肝癌細胞HepG2.2.15細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系。
2、收到人肝癌細胞HepG2.2.15細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人肝癌細胞HepG2.2.15細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。
4、收到人肝癌細胞HepG2.2.15細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過 80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時之需。
6、24 小時后,人肝癌細胞HepG2.2.15細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘??梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒: 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。