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簡要描述:青旗(上海)生物技術(shù)發(fā)展有限公司,總部位于上海浦東新區(qū),依托本地高校資源,逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺,在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營原代細胞、細胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細胞和HPLC檢測等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對用戶負責的態(tài)度,以對科研的高度嚴謹,以嚴格的質(zhì)量控制,為廣大生物醫(yī)學科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)!
更新時間:2021-05-24
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFN60800695 |
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規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 僅供科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
細胞名稱 | 人肝癌細胞BEL-7402 | ||
貨物編碼 | BFN60800695 | ||
產(chǎn)品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細胞數(shù)量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運輸方式 | 常溫保溫運輸 | 干冰運輸 | |
安全等級 | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 2類 |
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%雙抗(Hyclone) | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人肝癌細胞BEL-7402細胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標本中建立的。細胞群體倍增時間為20小時。移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結(jié)節(jié)。細胞形態(tài)呈上皮樣細胞。在電子顯微鏡下亦顯示上皮細胞所具有的橋粒和張力原纖維,與臨床肝癌細胞相似。分瓶培養(yǎng)第四天時,其有絲分裂指數(shù)約為7%。BEL-7402細胞的染色體數(shù)為不足三倍體,有一個異常的近端著絲點染色體。間接免疫熒光法測BEL-7402細胞內(nèi)的AFP為陽性反應(yīng)。LDH同工酶譜顯示與成年人肝細胞不同,而與人胚肝及臨床肝癌相近。 | ||
注釋 | Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=28807831). Originally thought to originate from a 53 year old male patient hepatocellular carcinoma. Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00549. Doubling time: 20 hours (PubMed=6154311); 31.2 +- 1.1 hours (PubMed=23167424). Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Deep quantitative proteome analysis. Omics: SNP array analysis. Omics: Transcriptome analysis. | ||
STR信息 | Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:12;D7S820:12;D8S1179:12;FGA:18,21;TH01:7;TPOX:12;vWA:16,18 | ||
參考文獻 | PubMed=6154311; DOI=10.1360/ya1980-23-2-236 Chen R.-M., Zhu D.-H., Ye X.-Z., Shen D.-W., Lu R.-H. Establishment of three human liver carcinoma cell lines and some of their biological characteristics in vitro. Sci. Sin. 23:236-247(1980)
PubMed=6275024; DOI=10.1099/0022-1317-57-1-95 Koshy R., Maupas P., Muller R., Hofschneider P.H. Detection of hepatitis B virus-specific DNA in the genomes of human hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis tissues. J. Gen. Virol. 57:95-102(1981)
DOI=10.1007/978-4-431-68349-0_4 Alexander J.J. Human hepatoma cell lines. (In) Neoplasms of the liver; Okuda K., Ishak K.G. (eds.); pp.47-56; Springer; Tokyo (1987)
PubMed=1849045 Fuhrer J.P., Xie H., Murphy M.J. Jr., Ye J.N., Yao Z. Characterization of a membrane-associated glycoprotein (gp 43) on human hepatocellular carcinoma by a monoclonal antibody. Cancer Res. 51:2158-2163(1991)
PubMed=14571772 Liu L.-X., Jiang H.-C., Liu Z.-H., Zhu A.-L., Zhou J., Zhang W.-H., Wang X.-Q., Wu M. Gene expression profiles of hepatoma cell line BEL-7402. Hepato-Gastroenterol. 50:1496-1501(2003)
PubMed=23167424; DOI=10.7314/APJCP.2012.13.9.4807 Gu W., Fang F.-F., Li B., Cheng B.-B., Ling C.-Q. Characterization and resistance mechanisms of a 5-fluorouracil-resistant hepatocellular carcinoma cell line. Asian Pac. J. Cancer Prev. 13:4807-4814(2012)
PubMed=23505090; DOI=10.1002/hep.26402 Wang K., Lim H.Y., Shi S., Lee J., Deng S., Xie T., Zhu Z., Wang Y., Pocalyko D., Yang W.J., Rejto P.A., Mao M., Park C.-K., Xu J. Genomic landscape of copy number aberrations enables the identification of oncogenic drivers in hepatocellular carcinoma. Hepatology 58:706-717(2013)
PubMed=28807831; DOI=10.1016/j.jhep.2017.08.002 Rebouissou S., Zucman-Rossi J., Moreau R., Qiu Z.-X., Hui L.-J. Note of caution: contaminations of hepatocellular cell lines. J. Hepatol. 67:896-897(2017) |
驗收細胞注意事項
1、收到人肝癌細胞BEL-7402細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系。
2、收到人肝癌細胞BEL-7402細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。
3、收到人肝癌細胞BEL-7402細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清。剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到 15%去培養(yǎng)。若細胞迏到 80%左右 ,血清濃度還是在 10%。
4、收到人肝癌細胞BEL-7402細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過 80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以備不時之需。
6、24 小時后,人肝癌細胞BEL-7402細胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加 3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般 1-3 分鐘,不超過 5 分鐘??梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒: 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用,請更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。