品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BFNE85965 |
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規(guī)格 | 48T/96T | 供貨周期 | 現貨 |
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主要用途 | 僅用于科研 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
產品名稱:大鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠α干擾素(IFN-α)水平。用純化的大鼠α干擾素(IFN-α)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入大鼠α干擾素(IFN-α),再與HRP標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠α干擾素(IFN-α)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠α干擾素(IFN-α)含量。
注:標準品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 pg/mL.
樣本處理及要求:
1.血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收 集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到 100萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上 進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。樣本在使用前也要在室溫平衡 60 分鐘。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間盡量控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,盡量做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔第one孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
(此圖僅供參考)
試劑盒名稱:大鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值為 0.95 以上。
2.批內變異系數與批間變異系數應分別小于10%和15% 。
檢測范圍:
1.25 pg/mL - 40 pg/mL
靈敏度:
di檢測濃度小于 0.1 pg/mL
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
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