動物elisa試劑盒基本原理是在測定時,受檢樣本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與溶液中的其他物質(zhì)分開,再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)結(jié)合在固相載體上,加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中要檢測的目標(biāo)物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
動物elisa試劑盒的檢測方法:
放射免疫法:以不同稀釋度的抗血清與優(yōu)質(zhì)符號抗原混合,孵育24h后,測定其結(jié)合率。一般以結(jié)合率為50%的血清稀度和為效價。如某抗血清的結(jié)合率為50%時的稀釋度為1:15000,則該血清的效價就是1:15000。抗血清的效價,除由抗血清自身的性質(zhì)決議外,還受符號抗原的質(zhì)量、孵育時刻,所用稀釋液的成分及其pH等要素的影響,在工作中有必要引起留意。
動物elisa試劑盒雙向分散法:使用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上分散,兩者在相交處發(fā)生沉積線,以調(diào)查和判別抗血清中是否有抗體及其濃度。
球脂板的制備:100ml pH7.1 的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi),于水浴中加溫,攪拌,使瓊脂*溶解,趁熱用紗布過濾,待溶液冷卻到65℃左右時,參加疊氮鈉,使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在潔凈平皿或玻片上,約3mm厚,待其冷卻,*凝固后,用打孔器打孔。中心孔內(nèi)加適量抗原,周圍各孔內(nèi)分別參加50μl 1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清,37℃下孵育24h,調(diào)查有無沉積線發(fā)生,以判別血清的稀釋度。